干货 | 紫外可见分光光度计使用中常见问题剖析
宣布日期2021-08-06 浏览 124896 次
焦点提醒
分光光度计是实验室里最常用的一种理化剖析仪器,本文就分光光度计在使用历程中泛起的几个常见问题,如仪器的预热、波长准确度的。
分光光度计是实验室里最常用的一种理化剖析仪器,本文就分光光度计在使用历程中泛起的几个常见问题,如仪器的预热、波长准确度的检查与校正、吸收池的使用要领、吸光度测定重复性等问题举行剖析,并提出解决这些问题的相宜要领。
紫外可见分光光度计是剖析测试实验室里常见的一种剖析仪器,用于测定被测物质在一定波长照射下所爆发的吸光 度的巨细,从而实现对物质举行定性或定量剖析。在平时的一样平常教学及到企业调研时,发明在分光光度计使用问题上,使用者多几几何都保存一些疑惑或使用不规范的问题,下面就常见的一些问题举行讨论。
01 关于仪器的预热问题
在一样平常分光光度计的使用说明书上,要求仪器预热时间约20分钟;若是带微处置惩罚器的分光光度计,开机后仪器自动进入自检 (初始化 )状态,约需1O分钟左右。在分光光度计预热这个环节上,许多使用者或多或少保存问题,如开机只预热电路系统 (不调理波长、翻开吸收池暗箱盖预热等)或以为初始化历程就是预热等等。
对带微处置惩罚器有自检功效的分光光度计,开机后仪器自检 (初始化)竣事后,在测定窗口上,设置所需波长值, 用一个吸收池装上纯清水置于光路上,调 “0000A”后,预热 仪器,当仪器显示读数不再转变后即可举行测定。
关于紫外可见分光光度计,由于有双光源 (钨灯与氘灯), 为了延伸灯的使用寿命,开机自检完成后可以关掉测准时不必的光源灯。
02 关于波长准确度的检查与校正
一样平常在使用分光光度计时,是否要经常举行仪器波长准确度的检查 ?谜底是否定的。当在一样平常测定中发明仪器测定迅速度下降,这时才应举行波长准确度的检查,最浅易的检查要领 (粗检 )是:仪器开机后,调理波长为 580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能视察到一长方形 的黄色光斑,说明波长准确度属正惯例模,不然就应举行波 长校正。
当仪器经由远程搬运、受过机械振动或替换光源灯胆后, 必需举行波长准确度的检查与校正。粗检同上,其校正要领 有:干预滤光片或镨钕滤光片校正法、使用氘灯的特征发射线校正法。详细办法可参考仪器使用说明书。
03 关于吸收池的使用问题
凭证吸收池使用的基本顺序辩白如下:
(1)吸收池的润洗
吸收池装液前必需用待装溶液润洗 2~3遍,润洗前是否 要用纯水先润洗一遍呢?这可看详细情形区别看待。
若是首次用干的吸收池装待测液 (特殊是有色溶液)时, 从维护保养吸收池的角度讲,为减小其干玻面临颜色的吸附能力,便于用后吸收池的洗濯,建议先用纯水润洗一遍,再用待装溶液润洗 2~3遍;若后再用此吸收池装浓度相近或更高浓度的溶液 (如从小到大测定标准系列溶液的吸光度)时, 可直接用待装溶液润洗2~3遍即可。
标准曲线法定量时,若是是先测定标准系列溶液的吸光度,当测到样品溶液时,由于测定的样品溶液浓度比最后一 个标准溶液的浓度低或不可知时,建议先用纯水润洗一遍, 再用待装溶液润洗 2~3遍。
(2)吸收池的装液、擦拭与安排 吸收池润洗完成后注入待测溶液至池高的 2/3~3/4处。
(3)吸收池成套性磨练及处置惩罚 新吸收池或吸收池使用一段时间后都必需举行成套性磨练。
04 关于吸光度测定重复性的问题
分光光度计在测定历程中,发明统一个溶液在差别时问里其测定效果差别,即重复性欠好,其缘故原由是什么?扫除测定过失因素外,可 能缘故原由有:
(1)仪器预热时间不敷或预热要领差池所造成,应延伸预热时间或接纳准确的预热要领。
(2)光电转换器 (如光电管)因长时间使用其光电转换 效率爆发了转变导致。这时标准溶液与待测溶液的吸光度都 同样变低,在相对定量时对效果影响很小。可是对这类仪器, 一 般建议一连使用时间不应凌驾 3h,若需长时间使用,最好间歇 30min 。
05 其他问题
(1)发明测定历程中的一些不良操作倒运于仪器的维护、保养,使用者应尽 可能阻止。如在仪器的上方举行操作(如倒溶液);拿出来的吸收池 (或吸收池架)放在仪器的面 板上;同实验室差别仪器的吸收池混用等。
(2)关于防尘、防潮问题
仪器一样平常都随机附有一只塑料布罩,不使用时用其罩住整个仪器,这是很好的防尘手段。但发明许多实验室里不必附来塑料布罩,而是 自己用一块通俗布或做成布罩来笼罩仪 器,防尘效果不如塑料布罩理想。另外,在塑料布罩只放入数袋防潮硅胶,也能更好起到延伸防潮的功效。在防潮时, 若是仪器设有防潮干燥筒的,应经常检查,发明变色连忙更 换新的或加以烘干再用。
恒久停用的分光光度计,要按期开机除潮,如每隔一个 月通电预热半小时,以坚持整机呈干燥状态,并且维持电子元件的性能 。
泉源:食物同伴网
文章图片来自网络